La enfermedad de rizado de la hoja amarilla del tomate (TYLCD) se ha convertido en el principal factor limitante para la producción de tomate en muchas áreas debido a la continua infección y recombinación de varias especies similares al virus del rizado de la hoja amarilla del tomate (TYLCV) que producen virus novedosos y destructivos. El microARN artificial (AMIR) es una tecnología reciente y efectiva utilizada para crear resistencia viral en cultivos importantes. Este estudio aplica la tecnología AMIR de dos maneras, es decir, amiRNA en intrones (AMINs) y amiRNA en exones (AMIEs), para expresar 14 amiARNs que apuntan a regiones conservadas en siete genes de TYLCLV y su ADN satélite. Los vectores resultantes pAMIN14 y pAMIE14 pueden codificar grandes grupos de AMIR y su función en el silenciamiento de genes reporteros fue validada con ensayos transitorios y plantas transgénicas estables. Para evaluar la eficacia de conferir resistencia contra TYLCLV, pAMIE14 y pAMIN14 fueron transformados en el cultivar de tomate A57 y las plantas de tomate transgénicas resultantes fueron evaluadas por su nivel de resistencia a la infección mixta de TYLCLV. Los resultados sugieren que las líneas transgénicas pAMIN14 tienen una resistencia más efectiva que las líneas transgénicas pAMIE14, alcanzando un nivel de resistencia comparable al de las plantas que portan el gen de resistencia TY1.