Los hidrocarburos aromáticos policíclicos (HAP) forman un grupo importante de contaminantes orgánicos debido a su distribución en el medio ambiente y sus efectos carcinogénicos y/o mutagénicos. Con el fin de identificar a nivel molecular algunos de los actores en la biodegradación y la respuesta de tolerancia a los HAP en las plantas, hemos fenotipado 32 líneas mutantes de T-DNA correspondientes a 16 genes de citocromo P450 (CYP) que mostraron ser expresados diferencialmente bajo condiciones de estrés contrastantes inducidas por el fenantreno, un HAP de 3 anillos. Este cribado nos ha permitido identificar a los mutantes de T-DNA (At5g07990) como los únicos que son sensibles al estrés inducido por fenantreno, apoyando que la proteína CYP75B1 es necesaria para la tolerancia a los HAP. El gen codifica una 3-flavonol hidroxilasa. El gen fue expresado heterológicamente en levaduras para investigar si afecta la respuesta al fenantreno participando en su metabolización. La enzima CYP75B1 producida heterológicamente muestra ser catalíticamente eficiente contra sus sustratos fisiológicos (por ejemplo, naringenina) pero incapaz de metabolizar fenantreno o 9-fenantrenol. En contraste, CYP75B1 parece estar más involucrado en la tolerancia al fenantreno como un elemento crucial al regular la concentración de antioxidantes a través de la producción de flavonoides 3-hidroxilados como la quercetina y la cianidina. En particular, informamos una generación altamente aumentada de especies reactivas de oxígeno (HO y oxígeno singlete) en los mutantes en comparación con las plantas de control en respuesta al tratamiento con fenantreno. En general, CYP75B1 muestra desempeñar un papel importante en la respuesta a los efectos perjudiciales de la exposición al fenantreno y esto está relacionado con la sensibilidad al estrés oxidativo más que con la metabolización.