Como una gran amenaza para el crecimiento normal del arroz, la sequía no solo restringe el crecimiento del arroz, sino que también afecta su rendimiento. Las glutatión S-transferasas (GSTs) tienen funciones antioxidantes y de desintoxicación. En el arroz, las GSTs no solo pueden hacer frente de manera efectiva al estrés biológico, sino que también desempeñan un papel defensivo contra el estrés abiótico. En este estudio, seleccionamos un gen miembro que fue inducido por la sequía para explorar el papel de las GSTs y analizar sus mecanismos fisiológicos involucrados en la tolerancia a la sequía del arroz. Con las técnicas del sistema de knockout CRISPR/Cas9, obtuvimos dos líneas mutantes independientes. Después de 14 días de tratamiento con estrés por sequía y luego de reabastecer agua durante 10 días, la tasa de supervivencia de las líneas mutantes se redujo significativamente en comparación con el tipo salvaje (WT). De manera similar, con el experimento de hidroponía al 10% de PEG6000 en la etapa de plántula, también encontramos que en comparación con el WT, la biomasa de los brotes y raíces de las líneas mutantes disminuyó significativamente. Además, tanto el contenido de MDA como de HO, que son tóxicos para las plantas, aumentó en las líneas mutantes. Por otro lado, la clorofila y la prolina disminuyeron aproximadamente un 20%. La actividad de la catalasa y la superóxido dismutasa, que reaccionan con peróxidos, también disminuyó alrededor de un 20%. En condiciones de sequía, en comparación con el WT, las expresiones de los genes relacionados con el estrés por sequía en las líneas mutantes se redujeron significativamente. Finalmente, concluimos que el knockout redujo significativamente la tolerancia a la sequía del arroz; podría ser utilizado como un gen candidato para el cultivo de arroz tolerante a la sequía. Sin embargo, el mecanismo molecular involucrado en la resistencia a la sequía del arroz necesita ser estudiado más a fondo.