El factor potenciador de los asesinos naturales (NKEF) pertenece a la familia de proteínas peroxirredoxinas, un grupo de antioxidantes que ha sido ampliamente estudiado en mamíferos. Recientemente, identificamos NKEF en el proteoma inmunoprecipitado de glóbulos rojos (RBCs) de trucha arcoíris expuestos al virus de septicemia hemorrágica viral (VHSV). En el presente estudio, evaluamos el papel de NKEF en la respuesta antiviral de la trucha arcoíris contra VHSV al examinar el perfil de expresión de NKEF en RBCs expuestos a VHSV y en la línea celular gonadal-2 de trucha arcoíris (RTG-2). Encontramos una correlación in vitro entre la disminución de la replicación de VHSV y el aumento de la expresión de NKEF después de que los RBCs fueron expuestos a VHSV; sin embargo, esto no se encontró en las células RTG-2, donde la infección aumentó considerablemente y los transcritos permanecieron casi sin cambios. Además, el silenciamiento del gen mediante siRNA en RBCs de trucha arcoíris y células RTG-2 resultó en un aumento de la replicación de VHSV. También encontramos una correlación entre el silenciamiento del gen y una disminución en la expresión de genes relacionados con la vía del interferón tipo 1 (IFN1). Estos hallazgos indicaron que NKEF está involucrado en los mecanismos antivirales de los RBCs de trucha arcoíris contra VHSV y, por lo tanto, apoyan su papel antiviral y su implicación en la modulación de su respuesta inmune. Finalmente, la sobreexpresión de NKEF en una línea celular EPC redujo significativamente la infectividad de VHSV y se asoció con un incremento en los genes relacionados con IFN1. En conclusión, NKEF puede ser un objetivo potencial para nuevas estrategias terapéuticas contra infecciones virales.