En Brasil, la producción de mulas con un andar cómodo implica principalmente la cría de mulas de silla de marcha. Esto se logra cruzando burros de marcha Pêga con caballos de las razas Mangalarga Marchador y Campolina. El SNP :g.22999655C>A está implicado en la regulación de los fenotipos de marcha observados en varias razas de caballos, incluyendo los andares batida (CC) y picada (CA) que se encuentran en estas razas. Nuestro objetivo fue determinar si los genotipos influían en el tipo de marcha en 159 mulas y 203 burros genotipados para el SNP mediante análisis PCR-RFLP. Aproximadamente el 47% de las mulas tenían el genotipo CC, mientras que el 53% tenía el genotipo CA. Los burros predominantemente tenían el genotipo CC (97%), y ninguno tenía AA. Tanto los genotipos CC como CA estaban distribuidos de manera uniforme entre las mulas con andares batida o picada. En los burros, las frecuencias del genotipo CC fueron consistentes independientemente del tipo de marcha. Sin embargo, el genotipo CA era más común en burros con andar picada que en burros con andar batida. La prevalencia de mulas CA y la rara presencia del alelo no de referencia en burros se alinean con hallazgos previos en caballos Mangalarga Marchador y Campolina. Esto sugiere que el alelo no de referencia probablemente se originó en las yeguas involucradas en los cruces con burros. Nuestros resultados también implican que factores más allá de esta variante, como otros genes y polimorfismos, influyen en los rasgos de marcha en los équidos.