Las células estromales mesenquimatosas (MSCs) derivadas del tejido adiposo se estudian ampliamente tanto en medicina humana como veterinaria. Su aislamiento se realiza generalmente mediante digestión con colagenasa seguida de filtración y eliminación de restos de tejido no adherente 48 horas después de la siembra. Observamos que los fragmentos de tejido desechado contienen células que se adhieren tardíamente al plástico. Nuestro objetivo fue investigar sus propiedades básicas para especular sobre la posible existencia de subpoblaciones de MSC. El tejido adiposo de tres perros fue digerido enzimáticamente. Se obtuvieron tres poblaciones celulares que se adhirieron al plástico de cultivo 48, 96 y 144 horas después de la siembra. Después de la expansión, se analizaron mediante citometría de flujo para marcadores positivos (CD90, CD44 y CD29) y negativos (CD14, MHCII y CD45) de MSC, así como para marcadores de células endoteliales, pericitos y células musculares lisas (CD31, CD146 y alfa-SMA). Además, se evaluaron las células por viabilidad, tiempo de duplicación y capacidad de diferenciación trilineal. No se encontraron diferencias significativas entre las tres subpoblaciones. Como resultado, este procedimiento ha demostrado ser un método valioso para mejorar drásticamente el rendimiento de las MSC. Como consecuencia de la optimización de la recuperación celular, la cantidad de tejido cosechado podría reducirse y el tiempo requerido para obtener suficientes células para aplicaciones clínicas podría acortarse. Se necesitan más estudios para descubrir posibles propiedades funcionales diferentes.