La fotoenzima fatty acid photodecarboxylase (FAP) ha surgido como un catalizador prometedor para la producción biológica redox-neutral de hidrocarburos. Estudios previos han demostrado que FAP puede convertir de manera eficiente ácidos grasos de cadena media, como el ácido n-octanoico, en hidrocarburos, superando a sus sustratos naturales de ácidos grasos de cadena larga (C16-C18). Esta observación amplía las aplicaciones potenciales de FAP para incluir disolventes y combustibles para aviación. Sin embargo, la disponibilidad limitada de fuentes naturales de ácido n-octanoico representa un desafío para la implementación industrial de la bioproducción de n-heptano. Este estudio investiga la capacidad de síntesis de hidrocarburos de una cepa de E. coli que expresa FAP y produce ácido n-octanoico, precursor del n-heptano, mediante una tioesterasa específica de octanoil-ACP. Se probaron varias FAP y tioesterasas. Un promotor inducible por luz azul aseguró una alta expresión de ambas enzimas, eliminando la necesidad de inductores químicos. La fusión de FAP con tioredoxina aumentó la producción de n-heptano 12 veces. Mediante una estrategia de co-cultivo, donde una cepa produce ácido n-octanoico y otra lo convierte en n-heptano, la producción de hidrocarburos se incrementó 14 veces en comparación con la co-expresión de FAP y la tioesterasa. Los co-cultivos operados en modo lote en fotobiorreactores de 100 mL permitieron la recuperación de n-heptano con pureza superior al 90%, alcanzando un rendimiento de 272 mg·L⁻¹ en 56 h. Este trabajo sienta las bases para el desarrollo de una bioproducción industrial de n-heptano.