La fosfomicina es un fármaco bactericida recomendado como tratamiento alternativo para la cistitis bacteriana canina, particularmente en casos que involucran infecciones multirresistentes (MDR) cuando no hay otras opciones disponibles. En este estudio, se determinaron la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración de prevención de mutantes (CPM) de fosfomicina contra 79 aislamientos clínicos utilizando el método de dilución en agar. La tasa de susceptibilidad a la fosfomicina fue del 86.06%, con valores de CMI y CMI de 4 mg/L y 96 mg/L, respectivamente. Los valores de CPM y CPM fueron de 64 mg/L y 192 mg/L. Utilizando datos farmacocinéticos (PK) de perros que recibieron una dosis oral única de 80 mg/kg de fosfomicina, el área bajo la curva por CMI (AUC/CMI) fue de 85.79 con un tiempo por encima de la CMI (T > CMI) que superó el 50%. En orina, el AUC/CMI fue de 10,694.78, y el AUC/CPM fue de 222.81, con T > CPM extendiéndose más allá de 24 h. Por lo tanto, la fosfomicina mostró una actividad antibacteriana significativa contra patógenos uropatogénicos caninos, incluyendo cepas MDR, a concentraciones por debajo del punto de corte de CMI susceptible. Sin embargo, los altos valores de CPM, especialmente el CPM, indican la importancia crítica de realizar pruebas de susceptibilidad para la fosfomicina y mantener un monitoreo continuo de la resistencia.