Nuestro objetivo fue evaluar los efectos de la concentración de esperma (150-250 x 10 esp/dosis) y la frecuencia de inseminación (una, dos y tres veces por semana) sobre la fertilidad y las características de los túbulos de almacenamiento de esperma (TASE). Los TASE se clasificaron en cinco categorías: es decir, TASE con un puntaje no evaluable (TASE1), vacíos (TASE2), bajos (TASE3), medios (TASE4) y altos (TASE5) en conteo de esperma después de la inseminación. Los resultados mostraron que solo la frecuencia de inseminación afectó la tasa de fertilidad (< 0.05). La mayor fertilidad se encontró en el grupo de inseminación tres veces por semana; sin embargo, esta tasa no fue significativamente diferente de la del grupo de inseminación dos veces por semana, excepto en el día 7, mientras que el grupo de inseminación una vez por semana mostró la tasa de fertilidad más baja (< 0.05) desde el día cuatro en adelante. En el día 1, las características de los TASE no mostraron diferencias entre las diversas frecuencias de inseminación. En el día 4, las categorías TASE2 y TASE3 aumentaron en el grupo de inseminación una vez por semana (< 0.05), mientras que las categorías TASE4 y TASE5 disminuyeron en comparación con los grupos de inseminación dos y tres veces por semana (< 0.05). En el día 7, solo el grupo de inseminación tres veces por semana mantuvo un nivel de túbulos de categoría TASE5 similar al medido en el día 1 (> 0.05). En resumen, la dosis de inseminación de 150 x 10 espermatozoides fue suficiente para la fertilización, y la inseminación tres veces por semana fue la frecuencia adecuada en gallinas nativas tailandesas viejas para mantener una alta densidad de esperma en los TASE a lo largo de la semana.