En la actualidad, aproximadamente un tercio de los objetivos de proteínas totales en el sector de investigación farmacéutica son basados en quinasas. Aunque las quinasas han sido objetivos atractivos para combatir muchas enfermedades, incluido el cáncer, la inhibición selectiva de quinasas ha sido un desafío, debido al alto grado de homología estructural en el sitio activo donde se unen muchos inhibidores de quinasas. A pesar de su eficacia como medicamentos contra el cáncer, los inhibidores de quinasas pueden exhibir una especificidad de objetivo limitada y racionalizar sus perfiles de objetivo en el contexto de mecanismos moleculares precisos o reorganizaciones es un gran desafío para el campo. Enfoques espectroscópicos como el infrarrojo, Raman, RMN y fluorescencia tienen el potencial de proporcionar información significativa sobre las interacciones entre fármacos y objetivos, así como entre fármacos y no objetivos, debido a su sensibilidad al entorno molecular. Esta revisión destaca la importancia de la fluorescencia para extraer información relacionada con propiedades estructurales, descubrimiento de conformadores ocultos en solución y en estado unido al objetivo, propiedades de unión (por ejemplo, ubicación de sitios de unión, enlaces de hidrógeno, hidrofobicidad), cinética y dinámica de los inhibidores de quinasas. Se concluye que la información obtenida de la comprensión de la fluorescencia intrínseca de estas clases de fármacos puede ayudar en el desarrollo de futuros medicamentos con efectos secundarios mejorados y menos resistencia a enfermedades.