Factores que afectan la viabilidad celular durante la disociación enzimática de tejidos tumorales endocrinos humanos
Autores: Shcherbakova, Anastasia; Utkina, Marina; Valyaeva, Anna; Pachuashvili, Nano; Bondarenko, Ekaterina; Urusova, Liliya; Popov, Sergey; Mokrysheva, Natalya
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Factores que afectan la viabilidad celular durante la disociación enzimática de tejidos tumorales endocrinos humanos
Categoría
Ciencias Naturales y Subdisciplinas
Subcategoría
Biología
Palabras clave
Disociación enzimática
Tejidos sólidos humanos
Matriz extracelular
Aislamiento de células individuales
Citometría de flujo
Estudios de scRNA-seq
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 51
Citaciones: Sin citaciones
La disociación enzimática de los tejidos sólidos humanos es un proceso crítico para desagregar la matriz extracelular y la aislamiento de células individuales para diversas aplicaciones, incluyendo la inmortalización de células primarias, la creación de nuevas líneas celulares y la realización de citometría de flujo y su tipo especializado, FACS, así como la realización de estudios de scRNA-seq. Los procedimientos de disociación de tejidos deben producir células individuales intactas y altamente viables que preserven la morfología y los marcadores de superficie celular. Sin embargo, los tejidos endocrinos, como los tumores de glándula suprarrenal, los carcinomas de tiroides y los tumores neuroendocrinos hipofisarios, presentan desafíos únicos debido a su compleja organización tisular y características morfológicas. Nuestro estudio realizó un examen morfológico de estos tejidos, destacando las estructuras intrincadas y los cambios degenerativos secundarios que complican el proceso de disociación. Investigamos los efectos de varios parámetros de disociación, incluyendo los tipos de enzimas, la duración de la incubación y los procedimientos de purificación post-disociación, como la eliminación de desechos y la lisis de células sanguíneas no objetivo, sobre la viabilidad de las células derivadas de diferentes tipos de tumores. Los hallazgos enfatizan la importancia de optimizar los protocolos de digestión de tejidos para preservar la viabilidad e integridad celular, asegurando resultados confiables para análisis posteriores.
Descripción
La disociación enzimática de los tejidos sólidos humanos es un proceso crítico para desagregar la matriz extracelular y la aislamiento de células individuales para diversas aplicaciones, incluyendo la inmortalización de células primarias, la creación de nuevas líneas celulares y la realización de citometría de flujo y su tipo especializado, FACS, así como la realización de estudios de scRNA-seq. Los procedimientos de disociación de tejidos deben producir células individuales intactas y altamente viables que preserven la morfología y los marcadores de superficie celular. Sin embargo, los tejidos endocrinos, como los tumores de glándula suprarrenal, los carcinomas de tiroides y los tumores neuroendocrinos hipofisarios, presentan desafíos únicos debido a su compleja organización tisular y características morfológicas. Nuestro estudio realizó un examen morfológico de estos tejidos, destacando las estructuras intrincadas y los cambios degenerativos secundarios que complican el proceso de disociación. Investigamos los efectos de varios parámetros de disociación, incluyendo los tipos de enzimas, la duración de la incubación y los procedimientos de purificación post-disociación, como la eliminación de desechos y la lisis de células sanguíneas no objetivo, sobre la viabilidad de las células derivadas de diferentes tipos de tumores. Los hallazgos enfatizan la importancia de optimizar los protocolos de digestión de tejidos para preservar la viabilidad e integridad celular, asegurando resultados confiables para análisis posteriores.