El objetivo de este estudio fue la evaluación de la actividad de locomoción de novillas y vacas lecheras Holstein durante el estro. Hemos analizado la actividad de locomoción utilizando el dispositivo Heatime RuminAct en 180 vacas (32 novillas y 148 vacas lecheras) y evaluamos un total de 633 ciclos de estro durante el período de referencia de 3 días antes del estro, 3 días después del estro y en el día de la ocurrencia del estro. Los datos fueron analizados utilizando el programa DataFlowTM II. La locomoción de las vacas se expresó en unidades de actividad de locomoción en 24 h (u.24 h). Durante el período de referencia de 3 días antes del estro, las vacas mostraron una actividad de locomoción de 558 u.24 h, con un aumento en la actividad de locomoción en el día del estro de 836 u.24 h, y, durante el período de referencia de 3 días después del estro, el nivel de actividad de locomoción disminuyó a 537 u.24 h, que es un nivel similar de actividad de locomoción al período de referencia antes del estro. A través del análisis estadístico, evaluamos el impacto de la paridad, la etapa de lactancia, la producción de leche y la individualidad en los cambios en la actividad de locomoción durante el estro y a lo largo del período de referencia, y encontramos un efecto significativo de la paridad (F = 13.41, < 0.001) en los cambios en la actividad de locomoción de las vacas lecheras durante el estro. Basado en estos resultados, esta investigación ofrece nuevas perspectivas sobre la evaluación de factores específicos que afectan la actividad de locomoción de las vacas lecheras durante el estro a través de la aplicación práctica de sistemas electrónicos para la detección del estro en las granjas lecheras.