Electroextracción de proteínas insolubles de la matriz orgánica de la capa nacarada de la ostra perlífera japonesa
Autores: Funabara, Daisuke; Miyashita, Natsumi; Nagai, Kiyohito; Maeyama, Kaoru; Kanoh, Satoshi
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2019
Acceso abierto
Artículo científico
2019
Electroextracción de proteínas insolubles de la matriz orgánica de la capa nacarada de la ostra perlífera japonesa
Categoría
Ingeniería y Tecnología
Subcategoría
Bioingeniería
Palabras clave
Capa nacarada
Cristales de aragonita
Matriz orgánica
Proteínas
Método de electroextracción
Patrones de SDS-PAGE
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 33
Citaciones: Sin citaciones
La capa nacarada de conchas y perlas está compuesta por cristales de aragonito dispuestos en una matriz orgánica. La matriz orgánica contiene quitina y varias proteínas que regulan la formación de la capa nacarada. Debido a sus fuertes interacciones en la matriz orgánica, el método actual para la extracción de proteínas insolubles de la capa nacarada pre-pulverizada implica calentamiento a altas temperaturas en presencia de un detergente (por ejemplo, dodecil sulfato sódico, SDS) y un agente reductor (por ejemplo, ditiotreitol, DTT), lo que probablemente induzca la degradación de proteínas. Por lo tanto, hemos desarrollado un método de electroextracción para aislar proteínas de la matriz orgánica de una lámina orgánica nacarada, que se obtuvo tras la descalcificación de conchas en su forma original. Nuestro método de electroextracción emplea condiciones más suaves sin calentamiento ni detergente. Los patrones de electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato sódico (SDS-PAGE) de las proteínas electroextraídas (EEPs) en condiciones no reducidas y reducidas revelaron que este método produjo un mayor número de proteínas diferentes en comparación con el método de extracción convencional y las EEPs aisladas conservaron sus enlaces disulfuro. Nuestro método es capaz de extraer fácilmente proteínas insolubles de la capa nacarada en condiciones suaves y sin duda ayudará en futuros análisis de las funciones de las proteínas de la capa nacarada.
Descripción
La capa nacarada de conchas y perlas está compuesta por cristales de aragonito dispuestos en una matriz orgánica. La matriz orgánica contiene quitina y varias proteínas que regulan la formación de la capa nacarada. Debido a sus fuertes interacciones en la matriz orgánica, el método actual para la extracción de proteínas insolubles de la capa nacarada pre-pulverizada implica calentamiento a altas temperaturas en presencia de un detergente (por ejemplo, dodecil sulfato sódico, SDS) y un agente reductor (por ejemplo, ditiotreitol, DTT), lo que probablemente induzca la degradación de proteínas. Por lo tanto, hemos desarrollado un método de electroextracción para aislar proteínas de la matriz orgánica de una lámina orgánica nacarada, que se obtuvo tras la descalcificación de conchas en su forma original. Nuestro método de electroextracción emplea condiciones más suaves sin calentamiento ni detergente. Los patrones de electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecil sulfato sódico (SDS-PAGE) de las proteínas electroextraídas (EEPs) en condiciones no reducidas y reducidas revelaron que este método produjo un mayor número de proteínas diferentes en comparación con el método de extracción convencional y las EEPs aisladas conservaron sus enlaces disulfuro. Nuestro método es capaz de extraer fácilmente proteínas insolubles de la capa nacarada en condiciones suaves y sin duda ayudará en futuros análisis de las funciones de las proteínas de la capa nacarada.