La creciente importancia del eje Siglec-ácido siálico en las enfermedades humanas, especialmente en el cáncer, ha hecho necesario identificar ligandos para los Siglecs. Las proteínas de fusión Siglec-Fc recombinantes se han utilizado ampliamente como detectores de ligandos y también como proteínas similares a anticuerpos dirigidas al ácido siálico para el tratamiento del cáncer. Sin embargo, las propiedades heterogéneas de las proteínas de fusión Siglec-Fc preparadas a partir de varios sistemas de expresión no se han elucidado completamente. En este estudio, seleccionamos células HEK293 y CHO para producir Siglec9-Fc y evaluamos más a fondo las propiedades de los productos. El rendimiento de proteína en CHO (8.23 mg/L) fue ligeramente superior al de HEK293 (7.46 mg/L). El Siglec9-Fc posee cinco sitios de N-glicosilación y uno de ellos se encuentra en su dominio Fc, lo cual es importante para el control de calidad de la producción de proteínas y también para la inmunogenicidad del Siglec-Fc. Nuestro análisis de glicosilación confirmó que la proteína recombinante de HEK293 recibió más fucosilación, mientras que CHO mostró más sialilación. Ambos productos revelaron una alta relación de dimerización y actividad de unión al ácido siálico, lo cual fue confirmado por la tinción de líneas celulares de cáncer y tejido de cáncer de vejiga. Finalmente, nuestro producto Siglec9-Fc se utilizó para analizar los ligandos potenciales en líneas celulares de cáncer.