Entre las principales enfermedades que afectan el cultivo de espárragos (L.), destaca a nivel mundial el marchitamiento vascular del espárrago causado por f. sp. Esta enfermedad acorta significativamente la longevidad del cultivo y limita la producción económica. Las medidas de control tradicionales han sido en gran medida ineficaces, y los métodos de control químico son difíciles de aplicar, lo que hace que los enfoques de control biológico, específicamente el uso de, sean una alternativa económica, efectiva y sin riesgos. Este estudio tuvo como objetivo identificar los principales factores que afectan la eficacia de los biopesticidas estudiados como Agentes de Control Biológico (ACB) contra el marchitamiento por Fusarium en espárragos y evaluar la eficacia de los biopesticidas a base de bajo condiciones de invernadero y semiprueba. Evaluamos la respuesta de tres spp. (, , y ) a variables ambientales, como la temperatura y la actividad del agua, y su capacidad antagónica contra f. sp. . Las tres especies inhibieron el crecimiento del patógeno in vitro. Una disminución en la actividad del agua llevó a una mayor reducción en la tasa de crecimiento. La eficacia de los tres agentes de control biológico disminuyó con temperaturas más altas, resultando en una inhibición mínima, particularmente bajo condiciones de agua disponible restringida en el ambiente. También se analizó el efecto de la densidad del inóculo fúngico a dos temperaturas diferentes. Se observó una correlación directa entre la cantidad de inóculo y la puntuación en el Índice de Severidad de la Enfermedad (ISE). Una notable reducción en el ISE fue evidente en tratamientos con alta densidad de inóculo (10 conidios/mL) para las tres especies probadas a ambas temperaturas. En pruebas de invernadero y semiprueba, observamos un control de la enfermedad menor al esperado, aunque y mostraron índices de severidad de la enfermedad más bajos y aumentaron el peso seco de plántulas y coronas, mientras que resultó en la tasa de enfermedad más alta y el peso seco más bajo. Este trabajo destaca que la eficacia de como ACB está influenciada por varios factores, incluyendo la cantidad de inóculos en el suelo y las condiciones ambientales. Los hallazgos del estudio tienen fuertes implicaciones para seleccionar especies apropiadas para controlar patógenos específicos bajo condiciones ambientales específicas.