La neosporosis bovina se encuentra entre las principales causas de aborto en el ganado a nivel mundial, causando graves pérdidas económicas en las industrias de carne y lácteos. Un método de diagnóstico altamente sensible y específico para la evaluación de la epidemiología de la enfermedad, así como su vigilancia y manejo, es imperativo, debido a la ausencia de un tratamiento o vacuna efectiva contra la neosporosis. En el presente estudio, se evaluó y comparó el rendimiento inmunodiagnóstico de la peroxiredoxina 2 (NcPrx2), la microneme 4 (NcMIC4) y el antígeno de superficie 1 (NcSAG1) para detectar anticuerpos IgG en ganado, en comparación con la prueba de anticuerpos fluorescentes indirectos (IFAT). Los resultados revelaron que NcSAG1 tuvo la mayor sensibilidad y especificidad, con valores de 88.4% y 80.7%, respectivamente, seguido de NcPrx2, con una alta sensibilidad de 87.0% pero una baja especificidad de 67.0%, mientras que NcMIC4 mostró una sensibilidad y especificidad de 84.1% y 78.9%, respectivamente, en comparación con IFAT. Se observó un alto grado de acuerdo para la proteína recombinante NcSAG1 (k = 0.713), mostrando la mayor capacidad diagnóstica, seguida de NcMIC4 (k = 0.64) y NcPrx2 (k = 0.558). El presente estudio demuestra que NcSAG1 es útil como un marcador antigénico y también demuestra las potenciales capacidades inmunodiagnósticas de NcPrx2 y NcMIC4, que podrían servir como marcadores diagnósticos alternativos para detectar infecciones en ganado. Estos marcadores pueden ser útiles en la gestión del tratamiento futuro, la vigilancia y la evaluación de riesgos de la neosporosis en el ganado o en otras especies de hospedadores animales. Se debe dirigir más investigación hacia la comprensión de las diferencias en la respuesta inmune in vivo resultantes de la inmunización con ambas proteínas recombinantes.