Evaluación de la actividad de supresión de silenciamiento de ARN de tres proteínas codificadas por el virus F de la cereza
Autores: Lotos, Leonidas; Katsiani, Asimina; Katis, Nikolaos I.; Maliogka, Varvara I.
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Evaluación de la actividad de supresión de silenciamiento de ARN de tres proteínas codificadas por el virus F de la cereza
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Botánica
Palabras clave
Virus de la cereza dulce
Silenciamiento de ARN
Virus de plantas
Supresores de silenciamiento de ARN
Experimentos de expresión transitoria
Vector que expresa GFP
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 10
Citaciones: Sin citaciones
El virus de la cereza F (CVF) es un virus de la cereza dulce recién emergido. El CVF ha sido identificado en un pequeño número de países y no se ha asociado con una sintomatología discreta. El silenciamiento de ARN es un mecanismo de defensa natural de las plantas contra invasores que degrada el ARN viral de manera específica según la secuencia. Como contramedida, los virus de las plantas codifican uno o más supresores de silenciamiento de ARN (RSS) que interfieren con la vía de silenciamiento a través de varios mecanismos. Para identificar posibles RSS, se seleccionaron las tres proteínas (MP, CPL, CPS) codificadas por el RNA2 del CVF y se clonaron por separado en el vector binario pART27. Los clones se utilizaron para experimentos de expresión transitoria en hojas, utilizando co-agroinfiltración con un vector que expresa GFP. En ambos CPL y CPS, se registró una rápida disminución de la fluorescencia, comparable al control negativo, mientras que el MP del CVF retuvo la fluorescencia de GFP durante unos días más, aunque esto se observó en un pequeño número de hojas infiltradas. Experimentos adicionales han demostrado que la proteína no pudo inhibir la propagación de la señal de silenciamiento de célula a célula; sin embargo, se registró una posible interferencia con el silenciamiento sistémico, especialmente cuando la inducción se llevó a cabo con ARN de GFP de doble cadena. En general, nuestros resultados indican que el MP del CVF está supuestamente implicado en la supresión del silenciamiento de ARN, aunque se necesitan más experimentos para desvelar el modo de acción exacto.
Descripción
El virus de la cereza F (CVF) es un virus de la cereza dulce recién emergido. El CVF ha sido identificado en un pequeño número de países y no se ha asociado con una sintomatología discreta. El silenciamiento de ARN es un mecanismo de defensa natural de las plantas contra invasores que degrada el ARN viral de manera específica según la secuencia. Como contramedida, los virus de las plantas codifican uno o más supresores de silenciamiento de ARN (RSS) que interfieren con la vía de silenciamiento a través de varios mecanismos. Para identificar posibles RSS, se seleccionaron las tres proteínas (MP, CPL, CPS) codificadas por el RNA2 del CVF y se clonaron por separado en el vector binario pART27. Los clones se utilizaron para experimentos de expresión transitoria en hojas, utilizando co-agroinfiltración con un vector que expresa GFP. En ambos CPL y CPS, se registró una rápida disminución de la fluorescencia, comparable al control negativo, mientras que el MP del CVF retuvo la fluorescencia de GFP durante unos días más, aunque esto se observó en un pequeño número de hojas infiltradas. Experimentos adicionales han demostrado que la proteína no pudo inhibir la propagación de la señal de silenciamiento de célula a célula; sin embargo, se registró una posible interferencia con el silenciamiento sistémico, especialmente cuando la inducción se llevó a cabo con ARN de GFP de doble cadena. En general, nuestros resultados indican que el MP del CVF está supuestamente implicado en la supresión del silenciamiento de ARN, aunque se necesitan más experimentos para desvelar el modo de acción exacto.