Los explantes placentarios humanos (HPEs) en cultivo han generado un interés significativo como un valioso modelo in vitro para estudiar las funciones de tejidos en respuesta a condiciones adversas, como fluctuaciones en los niveles de oxígeno, disponibilidad de nutrientes, exposición a microorganismos patógenos y compuestos tóxicos. Los HPEs ofrecen la ventaja de replicar el intrincado microambiente y la comunicación célula a célula involucrados en este órgano crítico y transitorio. Aunque las condiciones de cultivo de HPEs han sido ampliamente discutidas, no se ha delineado previamente un protocolo para evaluar la viabilidad y función de los HPEs durante un cultivo a corto plazo. En este estudio, hemos desarrollado un protocolo de cultivo a corto plazo de HPEs, específicamente hasta 72 horas, y hemos empleado análisis cuantitativos, semicuantitativos y cualitativos para evaluar la viabilidad y función del tejido con el tiempo. Bajo nuestras condiciones estandarizadas, los explantes de vellosidades placentarias comenzaron a recuperar sus propiedades estructurales (la integridad del trofoblasto y el estroma velloso) y la funcionalidad de los HPEs (producción de factores angiogénicos, endocrinos e inmunológicos) a partir de las 48 horas de cultivo. Esta restauración asegura un ambiente adecuado para varias aplicaciones. Los datos presentados aquí pueden ser muy valiosos para laboratorios que buscan implementar un modelo de HPEs, ya sea en el proceso de estandarización o buscando mejorar y optimizar las condiciones de trabajo y el tiempo con tejido placentario.