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Evaluación de Cribado y Funcional de Cuatro Promotores

Autores: Zhang, Chen-Yi; Ye, Zha-Long; Qi, Li-Wang; Yang, Ling; Li, Wan-Feng

Idioma: Inglés

Editor: MDPI

Año: 2024

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Acceso abierto

Artículo científico
2024

Evaluación de Cribado y Funcional de Cuatro Promotores


Categoría

Ciencias Agrícolas y Biológicas

Subcategoría

Botánica

Palabras clave

Promotores
Transformación genética
Genes
Expresión
Vectores
Actividad

Licencia

CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual

Consultas: 8

Citaciones: Sin citaciones


Descripción
Los promotores son herramientas poderosas para la creación de nuevas variedades utilizando tecnología transgénica. Sin embargo, la baja y inestable expresión de los genes objetivo sigue siendo un factor limitante en la transformación genética de Larix leptolepis (lárbol japonés). En este estudio, analizamos datos de transcriptoma, seleccionamos genes altamente expresados, clonamos sus promotores y construimos vectores de expresión vegetal que contenían el gen reportero impulsado por estos promotores. Los vectores recombinantes se introdujeron en el callo embriogénico mediante el método de transformación genética transitoria o estable mediada por Agrobacterium, y luego se determinó la actividad del promotor midiendo la expresión y su actividad enzimática en los materiales transformados. Se identificaron cuatro genes altamente expresados: , , y . Los fragmentos de 2000 pb aguas arriba del ATG en estas secuencias se clonaron como promotores y se nombraron , , , y . Los análisis de RT-PCR semicuantitativos y cuantitativos de los materiales de transformación genética transitoria mostraron que los cuatro promotores podían impulsar la expresión, lo que indica que tienen actividades de promotor. Los análisis de RT-PCR semicuantitativos y cuantitativos y la tinción histoquímica de los materiales de transformación genética estable mostraron que el promotor tenía una actividad más alta que los otros tres promotores y el promotor. Por lo tanto, se sugirió que el promotor se utilizara en la transformación genética de la larch.

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