El análisis de esperma de sementales está indicado para el diagnóstico de infertilidad, la pericia previa a la venta, la producción de dosis frescas o congeladas, y el control de calidad de pajillas congeladas. Se describen varios métodos de recolección y se pueden realizar numerosos ensayos sobre el semen. Determinar un enfoque para cada uno de estos casos es un desafío. Esta revisión tiene como objetivo discutir cómo obtener resultados clínicos relevantes, respondiendo a las preocupaciones de los propietarios de sementales. El semen se puede recolectar con una vagina artificial en un fantasma o en una yegua, mediante electroeyaculación bajo anestesia, o después de una inducción farmacológica. El método de recolección influye en el volumen y la concentración del semen, mientras que el número total de espermatozoides depende de la producción testicular y la frecuencia de recolección. En el plasma seminal, la acidez, la actividad pro-oxidante y algunas enzimas tienen repercusiones en la calidad del semen y su conservación. Además, las células no espermáticas del plasma seminal pueden impactar la conservación del semen. El análisis de motilidad sigue siendo un parámetro fundamental, ya que está asociado con la fertilidad de dosis frescas o congeladas. Los analizadores de motilidad asistidos por computadora han mejorado la repetibilidad, pero la reproducibilidad entre laboratorios depende de la configuración que se utilice. El análisis de morfología que muestra defectos en los espermatozoides es útil para entender las anomalías de producción y maduración. La tinción de los espermatozoides se utiliza para evaluar la viabilidad, pero los avances recientes en citometría de flujo y en fluorocromos permiten una evaluación de múltiples parámetros intracelulares. La expresión de proteínas de espermatozoides ya tiene aplicaciones clínicas, por ejemplo, como predictor de fertilidad y capacidad de congelación. En la actualidad, el análisis de semen de sementales abarca desde la evaluación macroscópica hasta la evaluación de proteínas de espermatozoides. Sin embargo, clínicamente, todos estos datos pueden no ser relevantes, y la falta de estandarización puede complicar su interpretación.