Numerosos genes regulan la reproducción masculina, modulando el desarrollo testicular y la espermatogénesis. Nuestro estudio aprovechó RNA-Seq para explorar genes candidatos y vías clave que influyen en la fecundidad en un híbrido F1 de carneros Southdown x Hu a través de cuatro hitos de desarrollo: M0 (0 meses, recién nacido), M3 (3 meses, sexualmente inmaduro), M6 (6 meses, sexualmente maduro) y Y1 (1 año, adulto). El examen histológico utilizando tinción con hematoxilina y eosina reveló que el área de sección transversal de los túbulos espermatídicos y el número de células de soporte aumentaron en los otros grupos, en comparación con el grupo M0. El área de sección transversal de la vasculatura y el número de células de soporte se encontraron significativamente aumentados en todos los otros grupos en comparación con el grupo M0. Realizamos análisis de GO y KEGG de los genes expresados diferencialmente (DEGs) en los tres grupos de comparación e identificamos vías clave, incluyendo cAMP, MAPK, interacciones receptor-ECM, PI3K-Akt y señalización FOXO, que están estrechamente relacionadas con el desarrollo testicular y la espermatogénesis. Notablemente, los eventos de empalme alternativo (AS) se elevaron marcadamente en las etapas M6 y Y1. Genes clave como , , , , , y surgieron como significativamente enriquecidos en estas vías, potencialmente orquestando la transición de testículos inmaduros a maduros en ovejas. Estos hallazgos ofrecen valiosas perspectivas sobre el potencial reproductivo masculino y pueden informar estrategias para optimizar la cría de animales.