La vitrificación es esencial para el éxito de la criopreservación de tejidos y el biobanco en gatos salvajes. Este estudio tuvo como objetivo comparar diferentes métodos de vitrificación (Sistema de Criopreservación de Tejido Ovarico-OTC, Pajillas-STW y vitrificación en Superficie Sólida-SSV) para la vitrificación de fragmentos testiculares en gatos machos. Se recuperaron fragmentos testiculares de cinco gatos machos adultos y se sometieron a vitrificación en equilibrio utilizando diferentes crioviales y métodos bajo las mismas condiciones de soluciones de vitrificación y crioprotectores. Las eficiencias de los métodos se evaluaron mediante análisis histológico de núcleos de espermatogonias y células de Sertoli, despegue de la membrana basal tubular seminífera y escala de puntuación de contracción del epitelio gonadal. La viabilidad celular se evaluó utilizando el ensayo de Hoechst PI y la técnica de marcado de extremos de corte de transferasa desoxirribonucleotídica terminal (TUNEL). Los resultados mostraron que el OTC es un método de vitrificación efectivo para mantener la distinción entre espermatogonias y células de Sertoli. El OTC fue similar al control en los parámetros de despegue de la membrana basal ( = 0.05). La contracción epitelial fue baja en el grupo SSV, que mostró el porcentaje más alto de células viables entre los grupos vitrificados ( = 0.0023). Los métodos de vitrificación OTC y SSV fueron estadísticamente similares en términos del porcentaje de células positivas para TUNEL ( = 0.05). Por lo tanto, OTC y SSV proporcionan condiciones favorables para mantener células viables de tejido testicular de gato después de la vitrificación.