Debido a sus propiedades fisicoquímicas, las sustancias per- y polifluoradas (PFAS) persisten y se bioacumulan en los organismos vivos, causando efectos adversos en la salud. Dado que la exposición a xenobióticos está influenciada por factores relacionados tanto con el organismo vivo como con los compuestos considerados, el biomonitoreo de la presencia de PFAS en el medio ambiente es de crucial importancia. Este estudio tuvo como objetivo detectar y cuantificar 15 PFAS en el músculo y el hígado de 40 ciervos de cola blanca de una zona específica en el norte de Italia mediante UPLC-HRMS. En los ciervos, las concentraciones de PFAS en el hígado fueron más altas que las observadas en el músculo (< 0.05). Aunque el contenido de PFAS en animales de áreas urbanizadas fue mayor que el encontrado en ciervos de áreas rurales, esta diferencia no fue estadísticamente significativa. En las ciervas, la concentración fue mayor que en los machos (< 0.05); además, los animales más viejos mostraron concentraciones más altas de PFAS en el hígado que los animales más jóvenes (< 0.05). En conclusión, la cantidad de PFAS fue mayor en los tejidos de ciervos de áreas urbanizadas, lo que muestra que esta especie podría servir como un buen bioindicador debido a su comportamiento territorial. El contenido de PFAS fue significativamente mayor en las ciervas, aunque la razón no se conoce completamente. Finalmente, la concentración de PFAS fue mayor en el hígado de los animales más viejos, probablemente debido a una función hepática comprometida.