El estrés tiene un impacto significativo en el bienestar equino. Existen algunos estudios sobre la respuesta al estrés en caballos montados con bridas ajustadas, pero se conoce poco sobre otros parámetros de estrés además del cortisol, que potencialmente podrían abordar un componente emocional. En este estudio, se utilizaron muestras de sangre de un total de 74 caballos de sangre caliente para establecer valores de referencia para las concentraciones de sustancia P (SP) en plasma. Además, 16 de estos caballos de sangre caliente fueron incluidos en un modelo de estrés. Se aplicaron cuatro niveles diferentes de estrés (nivel 1: caballos montados con brida suelta, nivel 2: brida ajustada, nivel 3: brida suelta y endoscopio de superficie, nivel 4: brida ajustada y endoscopio de superficie) para evaluar la SP como un posible parámetro de estrés en caballos. Se tomaron muestras de sangre en reposo (t0) y directamente después de inducir el estrés (ajuste de la brida, inserción del endoscopio; t1), así como después de 20 minutos de monta en todos los aires (t2). Se aplicó un etograma de caballos montados y mostró que los caballos del grupo con brida ajustada recurrían a otros problemas de comportamiento relacionados con el estrés que los caballos con bridas sueltas. El cortisol sérico mostró un aumento lineal concurrente con el aumento de los niveles de estrés, con una diferencia significativa entre el nivel 1 y el nivel 4 ( = 0.043), demostrando que los factores de estrés eran adecuados para evaluar la respuesta al estrés, mientras que la SP no mostró una correlación con los niveles de estrés. Además, las concentraciones de SP variaron ampliamente entre los caballos, pero se mantuvieron dentro de límites más estrechos en el caballo individual. Como conclusión, la SP podría no ser un parámetro de estrés confiable en caballos en el modelo de estrés menor aplicado.