El adenocarcinoma ductal pancreático (PDAC) es un tumor refractario con un mal pronóstico, y su microambiente complejo se caracteriza por una matriz intersticial fibrosa que rodea a las células de PDAC. El colágeno tipo I es un componente importante de esta matriz intersticial. El colágeno tipo I abundante promueve su deposición y entrecruzamiento para formar una barrera física rígida y densa, que limita la penetración de fármacos y la infiltración de células inmunitarias, y proporciona resistencia a los fármacos y adaptaciones metabólicas. En este estudio, para identificar el efecto físico del estroma, se utilizó colágeno tipo I como matriz 3D para cultivar células Capan-1 y generar un modelo 3D de PDAC. Mediante análisis del transcriptoma, se determinó una relación entre los efectos físicos inducidos por el colágeno tipo I y la promoción de la proliferación y migración de las células Capan-1. Además, el análisis metabolómico reveló que el efecto físico causó un cambio en el metabolismo hacia un fenotipo glucolítico. En particular, la alta expresión de prolina en los metabolitos sugiere la capacidad de mantener la proliferación de las células Capan-1 en condiciones hipóxicas y con déficit de nutrientes. En conclusión, identificamos los efectos físicos inducidos por el colágeno tipo I en la promoción de las células Capan-1, que causan la progresión del PDAC, brindando apoyo al papel del estroma denso en el microambiente del PDAC e identificando un método fundamental para modelar el complejo microambiente del PDAC.