La especie perenne, comúnmente conocida como hierba de San Juan, es muy valorada por sus atributos medicinales, particularmente sus fuertes efectos antiinflamatorios y antidepresivos. L., comúnmente conocido como bálsamo, se emplea extensamente tanto en la medicina tradicional como en la contemporánea debido a sus propiedades biológicas, aunque la distribución de la medicina de la planta está limitada a Europa y Asia. Este estudio pionero investiga el cultivo en un país mediterráneo, específicamente Grecia, centrándose en los efectos del riego y los biostimulantes de dos genotipos distintos sobre características cuantitativas (altura, rendimiento de droga, rendimiento de aceite esencial) y cualitativas (contenido y composición de aceite esencial). Se realizó un ensayo de campo en la granja experimental del Departamento de Agrotecnología de la Universidad de Tesalia, ubicada en la región de Larisa. Este estudio investigó varias variedades de prueba bajo diferentes niveles de riego y aplicaciones de biostimulantes. Los resultados subrayan la importancia de estrategias personalizadas de riego y biostimulantes en la mejora del rendimiento y la calidad durante la segunda temporada de crecimiento, estableciendo una base para el progreso agrícola sostenible. Notablemente, los tratamientos irrigados aumentaron significativamente la altura de las plantas, el rendimiento de biomasa seca y la producción de aceite esencial por hectárea. Específicamente, los rendimientos de aceite esencial para los tratamientos irrigados fueron casi el doble que los de los tratamientos de secano, con 219 kg/ha para secano y 407 kg/ha para irrigados. El genotipo desempeñó un papel crucial en la influencia del potencial de producción, la altura, la floración y la composición del aceite esencial, con una variedad demostrando floración bienal y compuestos de aceite esencial modificados. Si bien el riego impactó positivamente en el rendimiento, también redujo ciertos compuestos de aceite esencial mientras aumentaba el contenido de beta-pineno. Los efectos de los biostimulantes variaron según su composición, con algunos mejorando y otros disminuyendo el contenido de aceite esencial. Notablemente, el biostimulante que contenía algas con auxina y citoquinina (B2) resultó ser el más efectivo en la mejora del perfil terapéutico. Este estudio ofrece valiosos conocimientos sobre el cultivo en un clima mediterráneo, destacando la necesidad de continuar investigando sobre poblaciones nativas, niveles de riego, biostimulantes, fertilización y otros factores que afectan el rendimiento y las características de calidad de los cultivos.