La limitada capacidad de autorreparación del cartílago articular es un desafío para la curación de lesiones. Si bien las células madre/estromales mesenquimatosas (MSCs) son un enfoque prometedor para la regeneración de tejidos, los criterios para seleccionar una fuente celular adecuada siguen sin definirse. Para proponer un criterio molecular, se diferenciaron células madre de pulpa dental (DPSCs) con un patrón de expresión negativo y células madre estromales mesenquimatosas de médula ósea (BMSCs), que expresan activamente genes, hacia condrocitos en pellets 3D, empleando un protocolo de dos pasos. Se exploró la respuesta de las MSCs a la precondición por cloruro de cobalto (CoCl), un agente que imita la hipoxia, en una evaluación de la eficiencia de la diferenciación condrogénica utilizando experimentos morfológicos, histoquímicos, inmunohistoquímicos y bioquímicos. Los pellets de DPSCs precondicionados mostraron niveles significativamente elevados de colágeno II y glicosaminoglicanos (GAGs) y niveles reducidos del marcador hipertrofia colágeno X. No se observó un efecto significativo en la producción de GAGs en los pellets de BMSCs precondicionados, pero los niveles de colágeno II y colágeno X estaban elevados. Si bien la precondición no modificó la actividad específica de ALP en ninguno de los tipos celulares, fue notablemente más baja en los pellets diferenciados de DPSCs en comparación con sus contrapartes de BMSCs. Estos resultados podrían interpretarse como una demostración de la mayor plasticidad de las DPSCs en comparación con las BMSCs, sugiriendo la contribución de sus características moleculares únicas, incluido su patrón de expresión negativo, para promover un potencial de diferenciación condrogénica. En consecuencia, las DPSCs podrían considerarse candidatas atractivas para futuras terapias celulares de cartílago.