El nivel de vitamina D se conoce como un factor que puede influir en la condición física, pero pocos estudios han examinado este fenómeno entre los jóvenes atletas. Nuestro objetivo fue evaluar las asociaciones de los niveles de vitamina D (medidos por las concentraciones de 25-hidroxivitamina D-25(OH)D) con varias pruebas de condición física y rendimiento motor en jugadores jóvenes de fútbol. Este estudio transversal incluyó un total de 52 jugadores jóvenes de fútbol (15.98 +/- 2.26 años) del sur de Croacia. Los participantes fueron evaluados al final del período invernal y se recopilaron datos de medidas antropométricas (masa corporal y altura corporal), estado de vitamina D (niveles de 25(OH)D), pruebas de condición física (sprints de 10 y 20 m, prueba de 20 yardas, salto en contramovimiento, índice de fuerza reactiva (RSI)) y pruebas de rendimiento motor (CODS específico del fútbol, agilidad específica del fútbol y equilibrio estático). Entre los jugadores estudiados, el 54% tenía insuficiencia/deficiencia de 25(OH)D, lo que muestra que la falta de 25(OH)D es generalizada incluso en jóvenes atletas que viven en una latitud sur. El nivel de 25(OH)D se correlacionó con las pruebas de sprint de 20 m, las pruebas de 20 yardas y el RSI, mostrando un mayor papel de 25(OH)D en las pruebas de condición física donde la capacidad energética es esencial que en las pruebas de rendimiento motor relacionadas con el deporte donde las habilidades son cruciales. Nuestros resultados apoyan la idea de que la vitamina D puede desempeñar un papel determinante en las pruebas de condición física con un claro componente fisiológico, pero no es crucial en las pruebas de rendimiento motor relacionadas con deportes específicos donde las habilidades son un componente clave. Futuros estudios deberían investigar los efectos de la suplementación de vitamina D en el rendimiento en pruebas de condición física y rendimiento motor entre jóvenes atletas.