Se probó el método de dilución y la proporción para evaluar sus efectos en el semen de carnero después de la criopreservación. El Experimento I tuvo como objetivo explorar el efecto de varias proporciones de dilución (1:1, 1:2, 1:3, 1:4) del diluyente I (a base de Tris y yema de huevo) bajo la condición de dilución 1:1 del diluyente II (diluyente I y glicerol) en el semen de carnero preservado en nitrógeno líquido en relación con la motilidad de los espermatozoides y los parámetros cinéticos. El Experimento II tuvo como objetivo investigar el efecto de varias proporciones de dilución (1:1, 1:2, 1:3, 1:4) del diluyente I bajo la condición de dilución 1:2 del diluyente II en el semen de carnero para criopreservación sobre la motilidad de los espermatozoides y los parámetros cinéticos. El propósito del Experimento III es evaluar el efecto de varios métodos y proporciones de dilución en la criopreservación del semen de carnero mediante la detección de la motilidad de los espermatozoides, parámetros cinéticos, integridad de la membrana plasmática, integridad del acrosoma y nivel de especies reactivas de oxígeno (ROS). El Experimento III incluye cuatro grupos: método de dilución de un solo paso y método de dilución de dos pasos. El método de dilución de dos pasos incluye dos grupos: 1:2, 1:1 y 1:3, 1:2, y el método de dilución de un solo paso incluye dos grupos: 1:5 y 1:11. Los resultados indicaron que la motilidad total post-descongelada de los espermatozoides (TM), la motilidad progresiva (PM) y el grado medio de movimiento (MAD) fueron más altos en el grupo 1:2 y significativamente mayores (< 0.05) que los de los grupos 1:1 y 1:4 bajo la condición de dilución 1:1 del diluyente II. La TM y PM post-descongeladas de los espermatozoides del grupo 1:3 fueron significativamente mayores (< 0.05) que las de los otros grupos bajo la condición de dilución 1:2 del diluyente II. La TM, PM, integridad de la membrana plasmática e integridad del acrosoma de los espermatozoides post-descongelados del grupo de dos pasos (1:3, 1:2) fueron las más altas y significativamente mayores (< 0.05) que las de los otros grupos. Además, el nivel de ROS de los espermatozoides post-descongelados del grupo de dos pasos (1:3, 1:2) fue significativamente menor (< 0.05) que el de los grupos de un solo paso (1:5 y 1:11). Por lo tanto, se encontró que una dilución de dos pasos (1:3, 1:2) era el método y la proporción más adecuados para diluir el semen de carnero después de la criopreservación.