La maduración in vitro (MIV) y la activación artificial de ovocitos son pasos cruciales en el desarrollo de tecnologías de reproducción asistida (TRA), incluyendo la transferencia de núcleos de células somáticas. Aunque estas técnicas están bien establecidas en roedores de laboratorio, como ratones y ratas, siguen estando subdesarrolladas en especies silvestres, como el cobayo de dientes amarillos de Spix. Avanzar en las TRA en esta especie podría apoyar su conservación y ayudar a preservar la biodiversidad. Este estudio evaluó los efectos de dos concentraciones de factor de crecimiento epidérmico (FCE; 10 o 50 ng/mL) en el medio de MIV, así como el uso de 6-dimetilaminopurina (6-DMAP) durante la activación artificial de ovocitos. Los resultados mostraron que 10 ng/mL de FCE mejoró la viabilidad celular y mejoró la calidad morfométrica de los ovocitos en comparación con 50 ng/mL. Aunque el 6-DMAP influyó positivamente en las tasas de segmentación, no afectó significativamente la formación de mórulas. En conclusión, se recomienda 10 ng/mL de FCE para la MIV en ovocitos del cobayo de dientes amarillos de Spix, y el 6-DMAP muestra potencial para apoyar el desarrollo embrionario temprano, contribuyendo al establecimiento de protocolos de TRA para esta especie.