Efecto de los fijadores y el período de fijación en la morfología y la inmunohistoquímica del tejido ovárico felino
Autores: Alkali, Isa Mohammed; Colombo, Martina; Rodak, Olga; Nizanski, Wojciech; Luvoni, Gaia Cecilia
Idioma: Inglés
Editor: MDPI
Año: 2024
Acceso abierto
Artículo científico
2024
Efecto de los fijadores y el período de fijación en la morfología y la inmunohistoquímica del tejido ovárico felino
Categoría
Ciencias Agrícolas y Biológicas
Subcategoría
Zootecnia
Palabras clave
Fijadores
Protocolo de fijación
Tejido ovárico
Morfología
Sensibilidad a epítopos
Felino
Licencia
CC BY-SA – Atribución – Compartir Igual
Consultas: 9
Citaciones: Sin citaciones
Los fijadores y el protocolo de fijación tienen un profundo efecto tanto en la morfología como en la sensibilidad a epítopos del tejido ovárico, lo que dificulta la evaluación precisa del tejido ovárico. Nuestro objetivo fue establecer el protocolo de fijación más adecuado para el tejido ovárico felino. Se extrajeron fragmentos (1.5 mm de diámetro) de tejido ovárico felino de 1 mm de grosor, se dividieron en tres grupos y luego se fijaron con tres fijadores diferentes (Bouin, formalina tamponada neutra [NBF] y ácido acético [nueva formulación de fijador compuesto para tejido ovárico compuesta por 5% de ácido acético en NBF]) durante cinco períodos de fijación. Posteriormente, los fragmentos fueron procesados y evaluados por la morfología y la intensidad de las señales inmunohistoquímicas contra tres antígenos (Ki-67, MCM-7 y caspasa-3 activada). Las proporciones de folículos de grado 1 o morfológicamente intactos fueron significativamente más bajas en NBF en comparación con los fijadores Bouin y ácido acético. Sin embargo, el fijador Bouin tuvo la menor intensidad media de DAB (< 0.05) en los tres objetivos de antígenos, mientras que NBF tuvo la más alta (< 0.05) en Ki-67 y caspasa-3, pero en MCM-7 no fue diferente del ácido acético. En conclusión, el ácido acético mantuvo la arquitectura del tejido ovárico con una excelente morfología folicular de la misma manera que el fijador Bouin, y también mantuvo señales de DAB razonables similares a NBF, proporcionando así una mejor alternativa para estudios de tejido ovárico felino.
Descripción
Los fijadores y el protocolo de fijación tienen un profundo efecto tanto en la morfología como en la sensibilidad a epítopos del tejido ovárico, lo que dificulta la evaluación precisa del tejido ovárico. Nuestro objetivo fue establecer el protocolo de fijación más adecuado para el tejido ovárico felino. Se extrajeron fragmentos (1.5 mm de diámetro) de tejido ovárico felino de 1 mm de grosor, se dividieron en tres grupos y luego se fijaron con tres fijadores diferentes (Bouin, formalina tamponada neutra [NBF] y ácido acético [nueva formulación de fijador compuesto para tejido ovárico compuesta por 5% de ácido acético en NBF]) durante cinco períodos de fijación. Posteriormente, los fragmentos fueron procesados y evaluados por la morfología y la intensidad de las señales inmunohistoquímicas contra tres antígenos (Ki-67, MCM-7 y caspasa-3 activada). Las proporciones de folículos de grado 1 o morfológicamente intactos fueron significativamente más bajas en NBF en comparación con los fijadores Bouin y ácido acético. Sin embargo, el fijador Bouin tuvo la menor intensidad media de DAB (< 0.05) en los tres objetivos de antígenos, mientras que NBF tuvo la más alta (< 0.05) en Ki-67 y caspasa-3, pero en MCM-7 no fue diferente del ácido acético. En conclusión, el ácido acético mantuvo la arquitectura del tejido ovárico con una excelente morfología folicular de la misma manera que el fijador Bouin, y también mantuvo señales de DAB razonables similares a NBF, proporcionando así una mejor alternativa para estudios de tejido ovárico felino.