El objetivo de este experimento fue investigar los efectos de la temperatura de almacenamiento y el tiempo de conservación en las características de fermentación del líquido ruminal recolectado de seis ovejas Hu alimentadas con una dieta alta en forraje. Las temperaturas de almacenamiento se establecieron en -80 gradosC y -20 gradosC, y los tiempos de conservación se etiquetaron de la siguiente manera: 0 d (líquido ruminal fresco, D0), 7 d (D7), 14 d (D14), 30 d (D30), 60 d (D60), 120 d (D120) y 240 d (D240). Se aplicó un diseño de medidas repetidas para analizar las características de fermentación del líquido ruminal en cada punto de tiempo de conservación y temperatura de almacenamiento. Los resultados mostraron que la temperatura de almacenamiento no tuvo efectos significativos en el valor de pH, nitrógeno amoniacal (NH-N), proteína microbiana (MCP) y la concentración y proporción de ácidos grasos volátiles (AGV) ( > 0.05). Específicamente, el valor de pH aumentó en D7, D14 y D60 ( < 0.05), mientras que la concentración de MCP disminuyó en D7, D14, D30, D120 y D240 pero aumentó en D60 ( < 0.05), y la concentración de NH-N disminuyó en D14 ( < 0.05). La concentración de acetato aumentó en D30, mientras que las concentraciones de propionato, butirato, valerato y el total de AGV aumentaron en D60 ( < 0.05). La concentración de isovalerato disminuyó en D60, y las concentraciones de isobutirato y AGV de cadena ramificada disminuyeron en D120 ( < 0.05). La proporción de acetato aumentó en D30, mientras que las proporciones de butirato y valerato aumentaron en D60, y las proporciones de isovalerato, isobutirato y AGV de cadena ramificada disminuyeron en D60 ( < 0.05). Para el líquido ruminal de una dieta alta en forraje, la temperatura de almacenamiento (-80 gradosC y -20 gradosC) no afectó sus características de fermentación, lo que sugiere que el líquido ruminal podría ser preservado a -80 gradosC o -20 gradosC sin alterar sus características de fermentación. Los parámetros de fermentación del líquido ruminal cambiaron significativamente después de 7 días de conservación; por lo tanto, se recomienda terminar de determinar los parámetros de fermentación del líquido ruminal dentro de los 7 días posteriores a la recolección. Las concentraciones y proporciones de la mayoría de los AGV cambiaron después de 30 días de conservación; por lo tanto, se recomienda que la determinación de AGV se realice dentro de los 30 días posteriores a la recolección del líquido ruminal.