El cambio climático está provocando un aumento en la intensidad, duración y frecuencia de sequías severas, especialmente en el sur y sureste de Europa, agravando así los problemas de escasez de agua. El estrés por déficit hídrico perjudica el crecimiento, la fisiología y el rendimiento de cultivos como el trigo duro. Por lo tanto, estudiar las respuestas al estrés de variedades antiguas de trigo podría ayudar a identificar rasgos genéticos para mejorar la tolerancia de los cultivos a los estreses ambientales. En este contexto, este estudio tuvo como objetivo investigar los efectos del estrés hídrico estimulado por PEG 6000 en la variedad antigua de trigo Saragolla y en la moderna Svevo, analizando varios parámetros bioquímicos y moleculares que pueden condicionar especialmente el movimiento estomático. Nuestros datos revelaron que el estrés por sequía causó un aumento significativo en los niveles de azúcares solubles totales, ABA e IAA en ambas variedades seleccionadas, siendo mayor en la Saragolla que en la Svevo. Demostramos que, bajo estrés por déficit hídrico, la dinámica del calcio, así como la expresión de , , , y , involucradas en la activación de vías sensibles al calcio relacionadas con la sequía, muestran diferencias significativas entre las dos variedades. Por lo tanto, nuestro estudio proporcionó más evidencia sobre la capacidad de la variedad antigua de trigo Saragolla para hacer frente al estrés por sequía en comparación con la variedad moderna Svevo.