Este estudio se llevó a cabo para investigar los efectos de la alimentación con aceite esencial de orégano, butirato y su mezcla sobre la diversidad microbiana intestinal de los terneros. Se utilizó un diseño experimental completamente aleatorizado. Sesenta y cuatro terneras hembra Holstein neonatales sanas con un peso al nacer >= 35 kg fueron divididas aleatoriamente en un grupo de control y tres tratamientos (16 terneros por grupo). El grupo de control fue alimentado normalmente, y el grupo de tratamiento fue alimentado con aceite esencial de orégano, butirato y su mezcla, respectivamente. El experimento duró 70 días, y el período de lactancia duró 56 días. En los días 55 y 70, se recolectaron muestras fecales rectales de cinco terneros de cada grupo para la amplificación y secuenciación de 16S rRNA. Los resultados mostraron lo siguiente: (1) los tres tratamientos no tuvieron efectos significativos en la diversidad de la comunidad microbiana intestinal, la uniformidad de la comunidad y la diversidad del linaje de la comunidad de los terneros (> 0.05). (2) A nivel de filo, se detectaron Firmicutes, Bacteroidota, Spriochatetota, Actinobacteriota, Firmicutes y Bacteroidota como los principales grupos de bacterias en las heces. (3) A nivel de género, las diez especies con mayor abundancia relativa detectadas son: , , , , , , , , y , . (4) Los resultados del análisis LEfSe muestran que las especies con diferencias significativas en el grupo de control fueron , , , y , ; en el grupo de aceite esencial fueron , , , y ; en el grupo de butirato de sodio fueron , , ; en el grupo mixto fueron , . (5) El análisis de predicción funcional de los microbios intestinales de los terneros, encontrado en la vía KEGG2, muestra que el aceite esencial mejoró significativamente el transporte de membrana, el butirato de sodio inhibe el metabolismo de lípidos y mejora la resistencia del cuerpo a enfermedades (< 0.05). (6) Los efectos de cada tratamiento sobre la estructura microbiana intestinal de los terneros no duraron 14 días después de que se detuvo el tratamiento. En conclusión, la adición de aceite esencial de orégano, butirato y sus mezclas a la leche alimentada a los terneros puede modular la estructura microbiana, y se recomienda que el aceite esencial de orégano y el butirato se utilicen por separado, ya que una mezcla de ambos puede aumentar la tasa de diarrea en los terneros.