Nuestro objetivo era validar el uso de hisopos dérmicos para evaluar tanto la fisiología reproductiva como la fisiología del estrés en el pulpo de dos manchas de California. Nuestros objetivos eran (1) usar hisopos dérmicos para evaluar los glucocorticoides y las hormonas reproductivas; (2) determinar la influencia de la etapa de vida en la producción hormonal (glucocorticoides en todos los individuos; testosterona, estrógeno y progesterona en hembras; y testosterona en machos) de individuos reproductivos (n = 4) y senescentes (n = 8) para determinar el efecto de la edad en los patrones hormonales; y (3) determinar si estas hormonas cambian significativamente en respuesta a un estresor agudo. Para la prueba de estrés, los individuos fueron primero hisopados para establecer una línea base y luego perseguidos alrededor del acuario con una red durante 5 minutos. Después, los individuos fueron hisopados durante 2 horas en intervalos de 15 minutos para comparar con el hisopo previo a la prueba de estrés. Los individuos reproductivos respondieron al estresor con un aumento de 2 veces en las concentraciones dérmicas de cortisol a los 15 y 90 minutos. Seis de los ocho individuos senescentes no produjeron un aumento de 2 veces en las concentraciones dérmicas de cortisol. Los individuos reproductivos tenían concentraciones de hormonas sexuales significativamente más altas en comparación con los individuos senescentes (progesterona y estradiol medidos en hembras, y testosterona para ambos sexos). Después del estresor, solo los machos reproductivos produjeron un aumento de 2 veces en las concentraciones dérmicas de testosterona, mientras que las hormonas sexuales en hembras no mostraron cambios. La hormona de estrés cortisol fue significativamente más alta en senescentes que en reproductivos, independientemente del sexo. Las concentraciones dérmicas de corticosterona fueron más altas en hembras senescentes, seguidas de machos senescentes, y más bajas en individuos reproductivos sin importar el sexo. Los hisopos dérmicos proporcionan un medio efectivo y no invasivo para evaluar las hormonas del pulpo. La aplicación de estos indicadores puede ser imperativa ya que los cefalópodos son más comúnmente cultivados en cautiverio para experimentación, exhibición y consumo.