Este estudio evaluó la acumulación de biomasa y la producción de compuestos fenólicos en siete especies cultivadas in vitro bajo diferentes tratamientos de reguladores de crecimiento y períodos de cultivo. Los brotes se cultivaron en medio de Murashige y Skoog (MS) suplementado con benziladenina (BA) o meta-topolina (mT) y se analizaron después de 40 y 60 días. El medio MS suplementado con 0.2 mg/L de BA fue la condición más efectiva para promover la biomasa en todas las especies, con un aumento significativo del peso fresco de los brotes a los 60 días, particularmente en algunas especies. La cromatografía líquida de alta resolución acoplada con detección por arreglo de diodos y espectrometría de masas por ionización electrospray (HPLC-DAD-ESI-MS) identificó 13 compuestos fenólicos, incluidos flavonoles, ácidos hidroxicinámicos, antocianinas, floroglucinoles y naftodiantronas. Los perfiles fenólicos fueron específicos de cada especie e influenciados por el período de cultivo. Una de las especies acumuló el mayor contenido total de fenoles (37.6 mg/g DW), mientras que otra fue la principal productora de hipericina y pseudohipericina. Estos resultados destacan el papel crucial de las condiciones de cultivo en la regulación tanto de la biomasa como de la producción de fitoquímicos y proporcionan un enfoque prometedor para la producción de metabolitos bioactivos en especies a través de sistemas in vitro.