La atresia es un proceso en los folículos ováricos que está regulado por la apoptosis inducida por hormonas. Durante la atresia, la apoptosis de las células de la granulosa (CG) es un mecanismo clave orquestado a través de diversas vías de señalización. Se ha demostrado que la señalización del transcriptoma regulado por cocaína y anfetamina (CART) dentro de las CG ováricas desempeña un papel clave en la regulación de la atresia folicular en ganado, cerdos y ovejas. El presente trabajo tuvo como objetivo investigar el posible papel regulador local de CART en la apoptosis de CG inducida por atresia folicular en búfalos, centrándose en la modulación de las vías de señalización AKT/GSK3beta/beta-catenina, que son las vías de señalización intracelular involucradas en la viabilidad celular. Nuestros hallazgos revelaron un aumento en la expresión de CARTPT y BAX y niveles disminuidos de los genes AKT, beta-catenina y CYP19A1 en folículos atrésicos en comparación con folículos sanos. Posteriormente, el tratamiento con CART en presencia de FSH inhibió el aumento inducido por FSH en la viabilidad de CG al reducir la producción de estradiol y aumentar la apoptosis. Este cambio fue acompañado por un aumento en los niveles de expresión génica tanto de CARTPT como de BAX. A nivel de proteína, el tratamiento con CART en presencia de FSH afectó negativamente la actividad de AKT, beta-catenina y LEF1, mientras que la actividad de GSK3beta se vio potenciada. En conclusión, nuestro estudio muestra cómo CART influye negativamente en la viabilidad de CG en búfalos, subrayando la modulación de la vía AKT/GSK3beta/beta-catenina y promoviendo la apoptosis, un factor clave en la atresia folicular.