El uso creciente del pez cebra en experimentos científicos ha hecho necesario implementar protocolos de anestesia que garanticen un mínimo de dolor y sufrimiento para estos animales y aseguren la fiabilidad de los resultados obtenidos de su investigación. Por lo tanto, nuestro objetivo fue comparar la efectividad de dos anestésicos, eugenol y MS-222, en administraciones consecutivas y evaluar el comportamiento del pez cebra después de la anestesia repetida. Así, varios peces cebra fueron anestesiados con eugenol, MS-222 y MS-222 tamponado tres veces de manera repetida con un intervalo de 24 horas entre cada exposición. También se cronometraron los períodos de inducción y recuperación. Se determinó su frecuencia de nado después de cada exposición para evaluar su comportamiento tras la anestesia. La inducción de la anestesia fue más rápida con eugenol en comparación con MS-222. Sin embargo, el eugenol presentó tiempos de recuperación más largos, que se prolongaron después de cada exposición. Además, la frecuencia de nado se redujo después de cada anestesia con eugenol. La versión tamponada de MS-222 fue más eficaz que la no tamponada. Ambas versiones de MS-222 no afectaron la frecuencia de nado. Basado en estos hallazgos, recomendamos la utilización de MS-222 tamponado en lugar de eugenol cuando se necesite anestesia breve y repetida para un estudio.