Este estudio tuvo como objetivo evaluar diferentes ecotipos de L. bajo condiciones de déficit hídrico para identificar cambios en el contenido relativo de agua y los pigmentos fotosintéticos como indicadores de respuestas fisiológicas durante las estaciones de diferentes años. El experimento se llevó a cabo en un diseño de bloques al azar con tres réplicas. Se realizaron diez tratamientos como un factorial de 2 x 5, donde el primer factor de variación fue el contenido de agua en el suelo: sin déficit hídrico (NDW) con 100% de capacidad de campo (FC), y déficit hídrico (DW) correspondiente al 85.4% de la FC; y el segundo factor de variación comprendió cuatro ecotipos y una variedad. Se identificó un efecto significativo en la concentración de pigmentos fotosintéticos, principalmente en la clorofila total, con la clorofila a en el ecotipo 255301 con registros de 187.8, 167.5 y 194.6 mg g FW en DW, lo que corresponde a un aumento del 86.0%, 172.6% y 16.6%, respectivamente, en relación con los valores más bajos obtenidos en el ecotipo 202700 bajo NWD. En carotenoides, se observaron concentraciones más altas en los ecotipos 255301 y 202700 y la variedad Estanzuela Ganador bajo DW en la mayoría de los períodos estacionales, excepto en verano; se encontró una respuesta similar en el ecotipo 202700 y la variedad Estanzuela Ganador durante la temporada de invierno, también en DW. Los resultados mostraron que los dos primeros componentes principales explicaron el 71.8% de la variación total, con PC1 representando la clorofila, la clorofila y la clorofila total, y PC2 representando carotenoides, temperatura, índice relativo de clorofila y contenido relativo de agua. Las observaciones se agruparon en función del contenido de humedad del suelo, siendo el grupo de humedad óptima el que exhibió mayores concentraciones de clorofila y carotenoides. Los hallazgos sugieren que el contenido de humedad del suelo afecta significativamente el rendimiento de los ecotipos, y la planta muestra variaciones estacionales en respuesta a condiciones de déficit hídrico. Esta investigación contribuye a comprender las respuestas fisiológicas de y su potencial como cultivo forrajero eficiente en el uso del agua para promover la agricultura sostenible y mejorar la seguridad alimentaria.