Es bien conocido que los pollos de engorde machos y hembras muestran variaciones en su rendimiento de crecimiento, influenciadas por diversos factores fisiológicos. Este experimento tiene como objetivo explorar las posibles diferencias entre los pollos de engorde hembras y machos en relación con el rendimiento de crecimiento, la temperatura corporal, los metabolitos sanguíneos, las características de la canal y la arquitectura intestinal en respuesta a la suplementación con ácido guanidinoacético (GAA). Un total de 240 pollos de engorde Ross 308 fueron organizados en un diseño factorial de 3 x 2 y asignados aleatoriamente a 48 cajas, cada una conteniendo 5 aves. El experimento comprendió seis tratamientos, con ocho réplicas por tratamiento. Los principales factores investigados fueron los niveles dietéticos de GAA (0%, 0.06% y 0.12%) y el sexo (macho y hembra). Los pollos de engorde machos demostraron un aumento de peso corporal (BWG) y una ingesta de alimento (FI) superiores en comparación con las hembras (< 0.05). La suplementación con GAA a una concentración del 0.12% mejoró notablemente el BWG y redujo la FI y la relación de conversión alimenticia (FCR) en todas las fases experimentales (< 0.05). Sin embargo, las interacciones entre el sexo y el GAA fueron mínimas, excepto por la reducción de la FI y el FCR (< 0.05) en ambos sexos durante las primeras etapas de crecimiento. Independientemente del tratamiento con GAA, los machos mostraron temperaturas de espolón y cabeza más elevadas que las hembras. Las características de la canal fueron en gran medida no afectadas por la suplementación con GAA o el sexo, excepto por un mayor rendimiento cardíaco en los machos. Los niveles de metabolitos en suero no fueron diferentes entre los grupos de tratamiento a los 10 y 24 días de edad, excepto por un nivel más alto de creatinina en suero a los 10 días en las hembras con suplementación de 0.06% de GA (< 0.05). La morfología intestinal se vio significativamente afectada por el GAA y el sexo, dependiendo del segmento del intestino, en el que la suplementación con GAA aumentó significativamente la altura de las vellosidades, la profundidad de las criptas, el ancho de las vellosidades, el área de superficie y el conteo de células caliciformes, mientras que los machos mostraron consistentemente valores más altos de estos parámetros que las hembras, y se observaron diferencias entre los segmentos intestinales, especialmente en el íleon y el duodeno, a diferentes edades. En conclusión, las interacciones entre el GAA y el sexo tuvieron influencias mínimas en los índices de rendimiento de crecimiento. Sin embargo, los pollos de engorde machos demostraron una respuesta más pronunciada al GAA en relación con la arquitectura ileal. Este estudio destaca la importancia de suplementar las dietas de los pollos de engorde con GAA para optimizar el rendimiento de los machos y la función intestinal. La inclusión de GAA en las dietas de los pollos de engorde necesita más estudio para revelar los mecanismos subyacentes que impulsan estas respuestas específicas de sexo y evaluar los impactos a largo plazo de la suplementación con GAA en la salud y productividad de los pollos de engorde.