El ácido guanidinoacético (GAA) puede mejorar eficazmente el metabolismo de la energía y las proteínas al estimular la biosíntesis de creatina. Presentamos un estudio que explora el impacto del GAA en el rendimiento productivo, la bioquímica sérica, la calidad de la carne y la fermentación del rumen en ovejas Hu. Un total de 144 ovejas Hu machos destetadas (peso corporal 16.91 +/- 3.1 kg) fueron asignadas aleatoriamente a cuatro grupos con tres réplicas de doce ovejas en cada grupo. Las dietas se suplementaron con 0 (CON), 500 (GAA-1), 750 (GAA-2) y 1000 mg/kg (GAA-3) de GAA (peso del alimento), respectivamente. Después de un período experimental integral de 90 días, descubrimos que la suplementación de GAA tuvo un impacto notable en varios parámetros musculares. Específicamente, mejoró significativamente el crecimiento diario promedio (ADG) de los animales y mejoró la fuerza de corte y el diámetro de las fibras del músculo, al tiempo que redujo la pérdida por goteo y la densidad de las fibras musculares. Además, la adición de GAA al alimento elevó notablemente las concentraciones séricas de colesterol de lipoproteínas de alta densidad (HDL-C), proteína total (TP) y globulina (GLB), así como la actividad enzimática de la superóxido dismutasa (SOD) y la glutatión peroxidasa (GSH-Px). Concurrentemente, hubo una disminución en los niveles de triglicéridos (TG) y malondialdehído (MDA) en el suero. Además, el GAA disminuyó el pH y la relación acetato-propionato y aumentó los niveles de ácidos grasos volátiles totales (TVFA) y nitrógeno amoniacal (NH-N) del líquido ruminal. Adicionalmente, el GAA reguló al alza la expresión del gen de la acetil-CoA carboxilasa (ACC) en los músculos de las ovejas Hu. En conclusión, nuestros hallazgos sugieren que la suplementación con GAA no solo mejora la calidad muscular, sino que también afecta positivamente la bioquímica sérica y el metabolismo ruminal, lo que lo convierte en un candidato potencial para mejorar la salud y el rendimiento general de las ovejas Hu.