El estrés térmico en vacas lecheras durante el verano reduce la producción de leche y causa pérdidas económicas. Utilizando proteómica, analizamos exosomas plasmáticos de vacas con estrés térmico (HS) y sin estrés térmico (Ctr). Entre 46 proteínas expresadas diferencialmente, los grupos de proteínas citoesqueléticas, de señalización y de coagulación se regulaban al alza de manera significativa, y HP-25_1 se regulaba a la baja, lo que sugiere su utilidad como biomarcadores de estrés térmico en ganado lechero. Los análisis bioinformáticos encontraron que estas proteínas expresadas diferencialmente estaban enriquecidas en la regulación del citoesqueleto de actina, el estrés del retículo endoplásmico y las vías de señalización PI3K-Akt. En resumen, este trabajo destaca la utilidad de los exosomas plasmáticos para el estrés térmico y proporciona valiosos conocimientos sobre los mecanismos moleculares de la respuesta al estrés térmico.