Las bacterias lácticas (LAB) son probióticos ampliamente utilizados y ofrecen perspectivas prometedoras para aumentar la viabilidad de las abejas. Así, se determinó el potencial probiótico de 10 cepas de LAB que en nuestros estudios anteriores mostraron las habilidades protectoras más potentes. En el estudio actual, investigamos diversas propiedades de los candidatos probióticos. Las cepas de LAB probadas variaron en susceptibilidad a los antibióticos evaluados. Los aislados mostraron alta viabilidad en jarabes de azúcar y condiciones gastrointestinales. Ninguna de las cepas de LAB exhibió actividad beta-hemolítica, antagonismo mutuo, degradación de mucina, capacidad de producción de peróxido de hidrógeno o actividad de hidrolasa de sales biliares (BSH). Además, se evaluó la citotoxicidad de los sobrenadantes celulares libres de LAB (CFS), así como el efecto del CFS de 14/1 sobre la citotoxicidad de coumaphos y clorpirifos en la línea celular Caco-2. La viabilidad de las células Caco-2 alcanzó hasta el 89.81% en presencia de la mayor concentración de CFS. Además, los metabolitos de LAB disminuyeron la citotoxicidad de los insecticidas (hasta un 19.32%), demostrando así actividad citoprotectora. Todas las cepas de LAB probadas produjeron ácidos láctico, acético y malónico. Esta investigación permitió la selección de las cepas de LAB más efectivas, en términos de probiosis, para futuros estudios in vivo destinados a desarrollar una biopreparación ecológicamente protectora para las abejas.