La recuperación terciaria depende directamente de la alteración en la humectabilidad y la tensión interfacial (IFT), liberando así el petróleo atrapado en los poros de la roca. La inundación con bio-surfactantes para movilizar el petróleo residual en los reservorios es una perspectiva nueva y en desarrollo que se puede utilizar con más frecuencia en el futuro debido a su naturaleza ecológica y ventajas económicas. En este trabajo, se estudia el impacto de los rhamnolípidos como soluciones de bio-surfactantes solubles en agua sobre las actividades interfaciales del agua salina y la humectabilidad de la roca carbonatada a temperaturas elevadas. Se analiza la efectividad del bio-surfactante como modificador de la humectabilidad de la roca en presencia de diferentes salinidades, en particular de iones SO. La razón del enfoque en los iones SO es su alta afinidad hacia las superficies de calcita, y por lo tanto su capacidad para intervenir fuertemente en el rendimiento del bio-surfactante. Para lograr los objetivos de este estudio, las muestras de calcita húmeda de petróleo a temperatura elevada se sometieron a un proceso de lavado que incluía soluciones de bio-surfactantes en agua de mar a varias concentraciones de iones de sulfato de sodio, donde se tomaron las mediciones de los ángulos de contacto de cada muestra después del tratamiento y la IFT entre el modelo de petróleo y las soluciones de lavado. Los resultados obtenidos ilustraron que los bio-surfactantes (rhamnolípidos) con concentraciones crecientes de iones SO en agua de mar (hasta tres veces más altas que la concentración original de iones) pueden reducir la IFT y se evaluó el cambio de las rocas hacia una mayor humectabilidad por agua. Este estudio revela que la alteración de los iones SO tuvo un mayor impacto en la alteración de la humectabilidad, mientras que los rhamnolípidos fueron mejores para reducir la IFT entre la fase oleosa y la fase acuosa. Este estudio también examinó temperaturas de 50 grados C y 70 grados C, que demostraron influencias no deseadas en la humectabilidad y la IFT. Los bio-surfactantes a alta temperatura mostraron menos actividad interfacial, lo que indica que los rhamnolípidos no son activos a altas temperaturas, mientras que la adición de SO muestra una disminución continua en las mediciones del ángulo de contacto y la IFT a alta temperatura.