La evolución de la ingeniería de biomateriales permitió el desarrollo de productos que mejoran los resultados en el campo médico-dental. Los biovidrios han demostrado la capacidad de componer o reemplazar diferentes materiales en odontología. Este estudio evaluó la citotoxicidad, biocompatibilidad, deposición de calcio y maduración del colágeno de la pasta experimental de biovidrio 45S5 y Bio-C Temp, en comparación con la pasta de hidróxido de calcio (Ca(OH)). El biovidrio 45S5 y el polvo de Ca(OH) se mezclaron con agua destilada (proporción 2:1); Bio-C Temp está listo para usar. Las células de pulpa dental fueron expuestas a los extractos de los materiales (diluciones 1:2 y 1:4; 24, 48 y 72 h) para análisis de MTT y de viabilidad celular. Se implantaron tubos de polietileno llenos con las pastas, o vacíos (control), en el dorso de 16 ratas. Después de 7 y 30 días (n = 8/período), las ratas fueron eutanizadas y los especímenes fueron procesados para tinción con hematoxilina-eosina (H&E), von Kossa (vK) y rojo picrosirius (PSR), o sin tinción para análisis de birrefringencia con luz polarizada (PL). Se aplicó un análisis estadístico (< 0.05). No hubo diferencia en la viabilidad celular entre Ca(OH), biovidrio 45S5 y el control, en todos los períodos y diluciones (> 0.05), mientras que Bio-C Temp fue citotóxico en todos los períodos y diluciones en comparación con el control (< 0.05). En cuanto a la biocompatibilidad, hubo una reducción en la inflamación de 7 a 30 días para todos los grupos, sin diferencias significativas entre los grupos en ningún período (> 0.05). Las cápsulas fibrosas fueron gruesas para todos los grupos a los 7 días y delgadas a los 30 días. Todos los materiales mostraron estructuras positivas para el análisis de vK y PL. A los 7 días, el control y el biovidrio 45S5 mostraron más colágeno inmaduro que los otros grupos (< 0.05); a los 30 días, el biovidrio 45S5 tenía más colágeno inmaduro que maduro, diferente de los otros grupos (< 0.05). En conclusión, Bio-C Temp presentó citotoxicidad en comparación con los otros materiales, pero las tres pastas mostraron biocompatibilidad e indujeron deposición de calcio. Además, la pasta de biovidrio permitió una proliferación de colágeno marcada y continua. Este estudio contribuyó al desarrollo de nuevos biomateriales y destacó diferentes metodologías para comprender las características de los materiales médico-dentales.