El uso de nanopartículas de óxido metálico como agente antimicrobiano alternativo ha ganado atención debido al creciente problema de la resistencia antimicrobiana. Comprender sus propiedades y beneficios potenciales puede contribuir al desarrollo de tratamientos más efectivos y sostenibles en medicina veterinaria. El objetivo de este estudio fue caracterizar las formulaciones de TiO-NP y evaluar sus habilidades antibacterianas y de curación de heridas. Los diámetros y los potenciales zeta se determinaron utilizando el Zetasizer en conjunto con la dispersión de luz dinámica. Se utilizaron el método de difusión en agar, el ensayo cinético de muerte por tiempo y el ensayo de cristal violeta para evaluar sus actividades antimicrobianas. Se realizaron ensayos de curación de heridas tanto in vitro como in vivo. El estudio demostró que las formulaciones de TiO-NP exhiben propiedades antimicrobianas significativas contra varias cepas bacterianas. No se observó crecimiento medible dentro de un período de 15 minutos tras la exposición a las formulaciones de TiO-NP. La formación de TiO-NP puede mejorar la curación de heridas al aumentar la migración celular y la formación de colágeno en condiciones tanto in vitro como in vivo. En resumen, nuestro estudio sugiere que TiO-NP tiene el potencial de ser utilizado como agente antimicrobiano para el tratamiento de heridas en animales debido a su capacidad para suprimir el crecimiento bacteriano y la formación de biopelículas, así como para mejorar la curación de heridas.