El virus de la fiebre porcina africana (ASFV) codifica numerosas proteínas caracterizadas por complejos mecanismos de escape inmunológico. En la actualidad, la estructura y función de estas proteínas, incluida la proteína F317L, aún no se han elucidado completamente. En este estudio, examinamos la inmunogenicidad de la proteína F317L. Los ratones fueron inmunizados subcutáneamente con la proteína F317L utilizando dosis iniciales y posteriores de refuerzo, y, en el día 28 después del tratamiento, evaluamos las respuestas inmunitarias humoral y celular de los ratones. La proteína F317L estimuló la producción de anticuerpos específicos y activó respuestas inmunitarias humorales. Además, F317L estimuló la producción de grandes cantidades de IFN- por linfocitos esplénicos, activando así respuestas inmunitarias celulares. Utilizando tecnología informática, predijimos y sintetizamos 29 epítopos de células T de la proteína F317L, que fueron seleccionados utilizando IFN- ELISpot. Entre estos, el péptido F25 (SRRSLVNPWT) fue identificado como teniendo un efecto estimulante más fuerte que la proteína de longitud completa. En conjunto, nuestros hallazgos revelaron que la proteína F317L del ASFV puede estimular tanto una fuerte inmunidad humoral como celular en ratones, y que el péptido F25 (SRRSLVNPWT) puede ser un epítopo activo potencial de células T. Estos hallazgos proporcionarán una referencia para estudios más profundos sobre la proteína F317L y la selección de epítopos antigénicos.