La fibroína de seda es un biopolímero bien conocido que se utiliza en varias aplicaciones en las que se requieren interacciones con tejido biológico. La fibroína es extremadamente versátil y se puede moldear para formar varias estructuras que son útiles en aplicaciones de ingeniería de tejidos. La imagenología confocal se realiza generalmente para probar el comportamiento celular en una estructura y, en este contexto, la fluorescencia intrínseca de la fibroína se considera un problema. Además, la fluorescencia intrínseca no es lo suficientemente intensa como para proporcionar imágenes morfológicas útiles. De hecho, para estudiar la morfología de la estructura, se utilizan otras técnicas (es decir, SEM y Micro-CT). En este trabajo, proponemos un método basado en la transferencia de energía de fluorescencia (FRET) para suprimir la fluorescencia intrínseca de la fibroína y moverla a una longitud de onda más alta que sea accesible para la microscopía confocal para imágenes directas. Esto se logró creando dos parejas de FRET al dispersar dos fluoróforos (2,5-difeniloxazol (PPO) y Lumogen F Violeta 570 (LV)) en la matriz de fibroína y optimizando sus porcentajes para suprimir la fluorescencia intrínseca de la fibroína. Con la composición optimizada, producimos una alfombra electrohilada, y las dimensiones de las fibras se determinaron con precisión mediante microscopía confocal.