El objetivo de este estudio fue determinar los efectos de la variedad, la tasa de nitrógeno (N) y la aplicación de bioestimulantes en la composición química de la biomasa aérea del ballico perenne (L.). Un experimento de campo en una pequeña área se estableció en la Estación Experimental Agrícola en Tomaszkowo (53 grados 4240.8 N 20 grados 2604.7 E, noreste de Polonia). El experimento tuvo un diseño de parcelas divididas con tres repeticiones, y las variables experimentales fueron las siguientes: (i) variedad de ballico perenne: Bajka y Baronka, (ii) tasa de fertilizante de N: 0, 120, 240 kg N/ha, (iii) aplicación de bioestimulantes: Blatt Boden-Foliar (BB-F) y Blatt Boden-Foliar + Blatt Boden-Multical (BB-F + BB-M). Este estudio demostró que la variedad tetraploide Baronka tenía una composición química más deseable que la variedad diploide Bajka. La biomasa de la cv. Baronka tenía un mayor contenido de PC, FC y K, y se caracterizaba por valores más altos de verdor de hojas (SPAD). La fertilización con nitrógeno aumentó considerablemente el contenido de PC, P y K, y los valores de verdor de hojas (SPAD) en ambas variedades, y el aumento observado fue mayor cuando se aplicó N a 240 kg/ha. La tasa de fertilizante de N de 120 kg/ha llevó a una disminución significativa en el contenido promedio de Ca de las plantas, mientras que la tasa de fertilizante de N de 240 kg/ha no tuvo un efecto significativo en la concentración de Ca. Los bioestimulantes probados afectaron significativamente la composición química de la biomasa de ballico perenne, y su influencia fue mayor cuando se aplicaron en combinación. La aplicación foliar de Blatt Boden-Foliar y Blatt Boden-Multical aumentó el contenido de PC, P y clorofila en las hojas de ballico perenne, mientras que disminuyó la acumulación de FC, K y Ca en las plantas. Los bioestimulantes analizados tuvieron un efecto positivo en la composición química de la biomasa de ballico perenne. Esta es una consideración práctica importante porque se puede producir forraje verde de alta calidad para el ganado minimizando el uso de fertilizantes minerales y los impactos ambientales adversos.