Este estudio tuvo como objetivo investigar los patrones expresados espacial y temporalmente y las características biológicas en los yaks machos y explorar la posible correlación entre la esterilidad masculina de la descendencia híbrida de yak (denominada yak-vaca). Primero, la secuencia codificante (CDS) fue clonada por RT-PCR, y se realizó un análisis bioinformático con software relevante. Se empleó PCR cuantitativa en tiempo real (RT-qPCR) para detectar el perfil de expresión en varios tejidos de yaks machos adultos, la expresión espaciotemporal en diferentes etapas de los testículos de yak y la expresión diferencial entre los testículos de yak y los testículos de yak-vaca. La localización celular fue determinada por inmunohistoquímica (IHC). Además, el estado de metilación de la región del promotor fue analizado por PCR de secuenciación de bisulfito (BSP). Los resultados mostraron que tenía 1235 bp de longitud, incluyendo 1104 bp de la región CDS, que codificaba 367 aminoácidos. Era un gen conservado que compartía la mayor homología con (99.67%). Además, el análisis bioinformático reveló que TSSK1B era una proteína hidrofílica inestable que contenía principalmente la hélice alfa en un 34.06% y una bobina aleatoria del 44.41%, con una estructura transmembrana de 29 aminoácidos de longitud. Los resultados de RT-qPCR demostraron que se expresaba específicamente en los testículos de yak en comparación con otros tejidos y especialmente se expresaba en gran medida en los testículos de yak adultos. Por el contrario, apenas se expresaba en el testículo de los yaks-vaca adultos. La IHC confirmó que la proteína se expresaba más fuertemente en los testículos de yaks adultos que en sus contrapartes fetales y juveniles. Curiosamente, casi no se observó expresión en los testículos de yak-vaca en comparación con los testículos correspondientes de yak. La PCR de secuenciación de bisulfito (BSP) reveló que los sitios CpG metilados en la región del promotor de yak-vaca eran significativamente más altos que en el yak. En conjunto, este estudio reveló que se expresaba específicamente en los testículos de yak y se expresaba en gran medida al alcanzar la madurez sexual. Además, la rara expresión en yak-vaca puede estar relacionada con la hipermetilación de la región del promotor, proporcionando así una base para estudios posteriores sobre el mecanismo regulador de la esterilidad masculina en los yaks-vaca.